اپیتالون(لینک:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8.html) یک مولکول پپتیدی است که دارای فعالیت بیولوژیکی خوب و ارزش دارویی بالقوه است. در حال حاضر، تحقیقات پپتید اپیالون عمدتاً بر روی کاربرد آن به عنوان یک عامل ضد پیری متمرکز است.
Epitalon می تواند طول تلومرها را در انتهای کروموزوم ها با فعال کردن تلومراز افزایش دهد و در نتیجه بر تکثیر و بازسازی سلول های بنیادی تأثیر مثبت بگذارد. مطالعات نشان داده اند که Epitalon می تواند به طور قابل توجهی استرس اکسیداتیو مضر را مهار کند، آسیب DNA را کاهش دهد، و بیان فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF{2}}) را تنظیم کند و در نهایت به اثر کاهش سرعت دست یابد. پیری و افزایش طول عمر
علاوه بر این، Epitalon همچنین دارای اثرات سیستم ایمنی و محافظت کننده عصبی است. Epitalon می تواند ایمنی انسان را تقویت کند و تشخیص و پاکسازی بدن از آنتی ژن های ناهمگن و خود آنتی ژن را تقویت کند. علاوه بر این، Epitalon همچنین می تواند مرگ سلول های عصبی و تخریب عصبی را کاهش دهد، در نتیجه به اثرات محافظت کننده عصبی دست می یابد. Epitalon همچنین دارای اثرات ضد سرطانی است و اثرات خود را با تنظیم چرخه سلولی، ترویج آپوپتوز سلولی و مهار تکثیر سلول های تومور اعمال می کند.
|
|
|
Epitalon یک تقویت کننده بدن، یک ترکیب پلی پپتیدی است که از چهار اسید آمینه آلانین (Ala)، اسید گلوتامیک (Glu)، آسپاراژین (Asp) و لیزین (Lys) تشکیل شده است. روش های سنتز Epitalon عمدتا به سنتز شیمیایی و بیوسنتز تقسیم می شوند.
روش سنتز شیمیایی:
Epitalon یک پپتید متشکل از چهار اسید آمینه با فرمول مولکولی C14H22N4O9 است. Epitalon می تواند ترشح هورمون رشد انسانی را افزایش دهد، در نتیجه به تاخیر در پیری، بهبود خواب و تقویت ایمنی کمک می کند.
1. آماده سازی واکنش دهنده:
واکنش دهنده ها برای سنتز Epitalon شامل چهار اسید آمینه، آلانین (Ala)، اسید گلوتامیک (Glu)، آسپاراژین (Asp) و لیزین (Lys) و همچنین معرف های آسیل کننده مانند Boc-Lys-OtBu و Asp (OtBu) است. 2 و غیره. خلوص این آمینو اسیدها و معرف ها باید بالاتر از 99 درصد باشد در غیر این صورت کیفیت محصول تحت تاثیر قرار می گیرد.
2. مراحل سنتز شیمیایی
2.1 سنتز آلانین-4-هیدروکسی بوتیریک انیدرید (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >خلوص 95 درصد
2.2 سنتز Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 درصد
2.3 سنتز Epitalon:
Asp(OtBu)2 و Boc-Lys-OtBu را به ترتیبی که از قبل طراحی شده است به سیستم واکنش تراکم اضافه کنید و برای بدست آوردن Epitalon چندین واکنش متراکم انجام دهید. این فرایند به شرح زیر است:
آ. واکنش گروه ضد حفاظت:
ابتدا Asp(OtBu)2 حذف شد و گروه محافظ Asp(OtBu)2 با استفاده از هیدروکسید سدیم (NaOH) و اسید تری کلرواستیک (TCA) برای تولید واحدهای ساختاری Asp و آزادسازی BuOt در همان زمان حذف شد. زمان واکنش 1 ساعت و دما در دمای اتاق بود. پس از واکنش، خنثی سازی اسید و باز انجام دهید، مقدار زیادی محلول کلرید سدیم اشباع را اضافه کنید، سپس با اتانول رسوب کرده و در خلاء خشک کنید تا Asp به عنوان یک جامد سفید به دست آید.
ب واکنش تراکم:
Asp و Ala-Hyp-Glu-OtBu را به سیستم واکنش تراکم اضافه کنید و سپس چندین واکنش تراکم را برای بدست آوردن Epitalon انجام دهید. این فرآیند باید از طریق درمان های مختلف انجام شود.
مرحله اول: حذف گروه محافظ Ala-Hyp:
ابتدا Ala-Hyp-Glu-OtBu در متانول حل شد، اسید تری کلرواستیک (TCA) و آب برای حذف گروه محافظ Hyp-OtBu که برای محافظت از گروه آمینه برای تولید Ala-Hyp-Glu-OH استفاده می شد، اضافه شد. واکنش باید در دمای اتاق انجام شود و محلول واکنش پس از واکنش با NaOH درمان می شود تا اسیدیته خنثی شود.
مرحله دوم: گروه محافظ Glu-OtBu را حذف کنید:
سپس بعد از خشک شدن کامل، Ala-Hyp-Glu-OH با Boc-Lys-OtBu مخلوط شد، اسید تری کلرواستیک و آب مجدداً اضافه شد و واکنش در دمای اتاق انجام شد. این واکنش گروه محافظ Glu-OtBu را برای تولید Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu حذف می کند.
مرحله سوم: حذف گروه محافظ Lys:
در نهایت، افزودن تری کلرواستیک اسید، آب و متانول، گروه محافظ Boc-Lys-OtBu را برای تولید Epitalon حذف می کند. واکنش باید در دمای اتاق انجام شود و محلول واکنش پس از واکنش با NaOH درمان می شود تا اسیدیته خنثی شود.
3. تجزیه و تحلیل نتایج:
در نهایت محصول Epitalon به دست می آید که با روش های مختلف تحلیلی قابل شناسایی و خالص سازی است. به عنوان مثال، پارامترهایی مانند خلوص، ناخالصی ها و وزن را می توان با استفاده از روش های خالص سازی مانند داروسازی اروپایی (EP) یا داروسازی ایالات متحده (USP) تعیین کرد.
4. خلاصه:
Epitalon یک تقویت کننده بدن است که از چهار اسید آمینه آلانین، اسید گلوتامیک، آسپاراژین و لیزین تشکیل شده است. روش سنتز شیمیایی Epitalon عمدتاً شامل روش سنتز فاز جامد و روش سنتز فاز مایع است که نیاز به پیوند آمینو اسیدهای مختلف از طریق واکنش های چند مرحله ای دارد. این فرآیند مستلزم کنترل دقیق شرایط واکنش و تکنیک های خالص سازی برای اطمینان از محصولات با خلوص بالا است.
روش بیوسنتزی:
روش بیوسنتز استفاده از کاتالیز زیستی میکروارگانیسم ها یا آنزیم های مصنوعی برای تهیه Epitalon است که شامل تخمیر و کاتالیز آنزیمی می شود.
1. روش تخمیر: روش تخمیر یک روش بیوسنتزی با استفاده از میکروارگانیسم تراریخته اشریشیا کلی برای بیان Epitalon است. ابتدا توالی ژن Epitalon را در اشریشیا کلی قرار دهید و آن را برای بیان کشت انبوه کنید. سپس از تکنیک های مختلف تصفیه مانند کروماتوگرافی تبادل یونی و کروماتوگرافی ژل استفاده می شود تا در نهایت محصولات خالص به دست آید. مراحل مشخص به شرح زیر است:
1.1 باکتری میزبان مناسب را انتخاب کنید:
به منظور سنتز Epitalon، انتخاب یک سویه میزبان مناسب برای بیان ضروری است. باکتری های میزبان معمولاً شامل اشریشیا کلی (اشریشیا کلی)، مخمر (ساکارومایسس سرویزیه) و قارچ ها (Aspergillus oryzae) هستند. هنگام انتخاب باکتری میزبان، باید در نظر گرفت که آیا باکتری میزبان توانایی سنتز موثر پروتئین ها را دارد، آیا می تواند پروتئین ها را به درستی تا و اصلاح کند و آیا می تواند محصولات هدف با بازده بالا تولید کند یا خیر.
1.2 طراحی توالی ژن و کلون:
پس از انتخاب باکتری میزبان، توالی ژن Epitalon (شامل آلانین، اسید گلوتامیک، آسپاراژین و توالی های باز لیزین) باید از طریق فناوری نوترکیبی DNA به باکتری میزبان وارد شود. به طور معمول، توالی ژن در یک ناقل بیانی که شامل عناصری مانند توالی های پروموتر و پایان دهنده و یک نشانگر آنتی بیوتیکی قابل انتخاب است، کلون می شود.
1.3 بیان و تطهیر:
پس از تکمیل شبیه سازی، ناقل بیان به باکتری میزبان تبدیل شده و سپس کشت داده می شود. در طول فرآیند کشت، باکتری میزبان Epitalon را با توجه به توالی ژن در ناقل بیان سنتز می کند. هنگامی که محصول به مقدار کافی تولید شد، می توان آن را با روش های مختلف خالص سازی از سلول ها جدا کرد و Epitalon با خلوص بالا بدست آورد.
2. روش کاتالیز شده با آنزیم: روش کاتالیز شده با آنزیم سنتز Epitalon از طریق پیوند اسیدهای آمینه مختلف با آنزیم های مختلف است. برای مثال، L-گلوتامات{4}}آمیناز برای کاتالیز کردن واکنش گلوتامات و بوتیرات برای سنتز Glu-OtBu استفاده میشود. سپس، از ال-آسپاراژیناز برای کاتالیز کردن واکنش تراکم آسپاراژین و Ala-Hyp-Glu-OtBu برای به دست آوردن Epitalon استفاده کنید.
روش های سنتز Epitalon عمدتا به سنتز شیمیایی و بیوسنتز تقسیم می شوند. سنتز شیمیایی در حال حاضر رایج ترین روش سنتز Epitalon است. بیوسنتز برای تهیه Epitalon از طریق کاتالیز زیستی میکروارگانیسم ها یا آنزیم های مصنوعی، از جمله تخمیر و کاتالیز آنزیمی است. اگرچه روشهای بیوسنتزی پتانسیل بالایی دارند، تحقیقات و بهینهسازی بیشتر هنوز مورد نیاز است. Epitalon یک داروی بالقوه با چشم انداز کاربرد گسترده است که می تواند در زمینه های ضد پیری، تنظیم ایمنی، محافظت عصبی و درمان سرطان استفاده شود. در عین حال، Epitalon همچنین می تواند به عنوان یک غذای بهداشتی و محصول مراقبت بهداشتی برای کمک به مصرف کنندگان در مقاومت در برابر پیری، تقویت ایمنی و کاهش خطر بیماری استفاده شود. اگرچه تحقیقات در مورد Epitalon هنوز در مراحل اولیه است، اعتقاد بر این است که با تحقیقات عمیق در مورد مکانیسم و عملکرد آن، Epitalon به یک محصول مهم دارو و مراقبت های بهداشتی تبدیل خواهد شد.