3xflag پپتیدیک دنباله مهم نشانگر پپتید است که به طور گسترده در فرآیندهای بیان و تصفیه پروتئین در تحقیقات زیست پزشکی مورد استفاده قرار می گیرد. فرمول مولکولی C120H169N31O49S ، CAS 402750-12-3. تشکیل شده از 23 اسید آمینه ، دنباله آن شامل سه نقوش تکرار شده ASP Tyr Lys XAA XAA ASP است که به آن ویژگی های ساختاری خاصی می دهد. حلالیت خوبی در حلال های خاص دارد. به عنوان مثال ، در DMSO ، حلالیت آن زیاد است و باعث می شود که برای عملیات و آزمایشات در محلول راحت باشد. علاوه بر این ، همچنین می تواند از طریق گرمایش خفیف به اثر انحلال خوب در آب برسد. همچنین دارای برخی از خصوصیات خاص است. به عنوان مثال ، آنتی ژن و واکنش پذیری خوبی دارد و می تواند به آنتی بادی های ضد پرچم خاص متصل شود. این توانایی اتصال باعث می شود که آن را در آزمایشاتی مانند سیستم ایمنی بدن کاربرد داشته باشد. با اتصال رقابتی به آنتی بادی های ضد پرچم ، فیوژن پرچم بیان شده پروتئین که به آنتی بادی های ضد پرچم متصل می شود می تواند در حین سیستم ایمنی بدن انجام شود و از این طریق به محلی سازی ، تشخیص و تصفیه پروتئین هدف می رسد.
|
کلاه های بطری سفارشی و چوب پنبه:
|
|
|
فرمول شیمیایی |
C120H169N31O49S |
|
توده دقیق |
2860 |
|
وزن مولکولی |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
تجزیه و تحلیل ابتدایی |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3xflag پپتیدبرچسب مورد استفاده در تحقیقات پروتئین است که از 8 اسید آمینه با توالی dykdhdhdgdykdhdidykdddddk تشکیل شده است. عملکرد اصلی آن به عنوان نشانگر بیان پروتئین و تصفیه ، فراهم کردن وسیله ای مناسب و کارآمد در تحقیقات است.
1. تصفیه وابستگی:
می توان از آن به عنوان یک برچسب برای تصفیه پروتئین استفاده کرد و از طریق میل و میل زیاد آن با آنتی بادی های ضد پرچم ، پروتئین هدف را می توان به راحتی تصفیه کرد. معمولاً ، پروتئین هدف به سلولهای دارای یک بردار بیان حاوی پپتید پرچم 3 برابر منتقل می شود ، و سپس با استفاده از آنتی بادی های ضد پرچم به سرعت و کارآمد پروتئین هدف با خلوص بالا به دست می آید.
2. آزمایش ایمونولوژیکی:
به دلیل ایمنی زیاد آن ، می توان از آن برای تشخیص بیان پروتئین و بومی سازی استفاده کرد. با استفاده از آنتی بادی های ضد پرچم خاص ، تکنیک های آزمایشی مانند ایمونوبلوتینگ و رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس را می توان به سرعت و با دقت تشخیص سطح بیان و توزیع پروتئین های هدف انجام داد.
3. فیلتر کلون:
همچنین می توان از آن برای راحتی غربالگری کلون پروتئین استفاده کرد. در فرآیند ساخت بردارهای بیان پروتئین ، اتصال توالی ژن پروتئین هدف با3xflag پپتیددنباله می تواند غربالگری کلون های مثبت با پروتئین هدف را از طریق تشخیص ایمنی و سایر روشها تسهیل کند و از این طریق روند تحقیقات عملکرد پروتئین را تسریع کند.
4. سیستم ایمنی بدن:
همچنین می توان از آن برای آزمایش های ایمنی پروتئین استفاده کرد. با اتصال پروتئین های حاوی 3 برابر برچسب پپتید پرچم به آنتی بادی های ضد پرچم ، و سپس با استفاده از مواد جذب مانند پروتئین A/G آگارز یا دانه های مغناطیسی ، پروتئین هدف و شرکای متقابل آن می توانند به صورت انتخابی از عصاره های سلولی رسوب شوند تا شبکه تعامل پروتئین را مطالعه کنند.
5. غربالگری مواد مخدر:
همچنین می تواند در تحقیقات غربالگری مواد مخدر مورد استفاده قرار گیرد. با ترکیب برچسب پپتید پرچم 3X با پروتئین مورد علاقه ، غربالگری با توان بالا پروتئین می تواند حاصل شود. از این روش غربالگری می توان برای کشف اهداف جدید دارو ، ارزیابی تعامل پروتئین دارویی و غیره استفاده کرد.
6. تحقیقات عملکرد پروتئین:
معرفی برچسب ها به طور قابل توجهی بر ساختار طبیعی و عملکرد پروتئین ها تأثیر نمی گذارد و بنابراین می تواند برای بررسی عملکردهای بیولوژیکی ، محلی سازی درون سلولی ، تعامل و انتقال سیگنال پروتئین ها استفاده شود. با معرفی برچسب پپتید پرچم 3X ، تحقیقات عمیق را می توان در مورد ویژگی های بیولوژیکی پروتئین ها انجام داد ، که به آشکار کردن مکانیسم های عملکرد آنها در زیست شناسی سلولی و فیزیولوژی کمک می کند.
3xflag پپتیدیک پپتید حاوی 8 اسید آمینه است ، با توالی dykdhdgdykdhdidykddddk. این ماده معمولاً به عنوان یک برچسب پروتئین برای تصفیه مناسب ، تشخیص و تحقیقات پروتئین های هدف استفاده می شود. در فرآیند بیوسنتز ، می توان آن را از طریق سنتز شیمیایی یا روشهای مهندسی ژنتیک تهیه کرد. در زیر مراحل دقیق روشهای مهندسی ژنتیک وجود دارد:
1. طراحی و سنتز ژن ها:
در مرحله اول ، نیاز به طراحی یک ژن مصنوعی حاوی توالی پپتید پرچم 3x است. این ژن باید حاوی توالی پپتید پرچم 3x و همچنین پروموتورهای مناسب ، پایانه ها و نشانگرهای انتخاب (مانند ژن های تحمل آنتی بیوتیکی) باشد. طراحی ژن ها باید ویژگی ها و نیازهای بیان میزبان هدف را در نظر بگیرد.
2. کلونینگ ژن:
در مرحله بعد ، ژنهای مصنوعی طراحی شده در بردارهای بیان مناسب کلون می شوند. بردارهای متداول شامل پلاسمیدها ، بردارهای ویروسی و غیره هستند. فرآیند کلونینگ به طور معمول شامل مراحل زیر است:
تقویت -PCR: با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای تقویت توالی ژن هدف از DNA الگو.
-Digestion و اتصال: محصولات PCR با استفاده از بردارهای بیان با استفاده از اندونوکلئازها محدود شده هضم می شوند و سپس توسط لیگازهای DNA به هم متصل می شوند.
-Transformation: تبدیل بردار بیان متصل به میزبان باکتریایی مانند اشرشیاکلی برای تشکیل پلاسمید نوترکیب.
شناسایی: پلاسمیدهای نوترکیب از طریق PCR ، هضم آنزیم ، توالی DNA و روش های دیگر برای تأیید اینکه ژن هدف با موفقیت در وکتور کلون شده است ، شناسایی شدند.
3. پروتئین هدف بیان:
وکتور بیان ساخته شده را به سلولهای میزبان هدف مانند سلولهای پستانداران ، سلولهای مخمر ، سلول های حشره و غیره در داخل سلول ها منتقل کنید ، وکتور بیان به mRNA رونویسی می شود و سپس به پروتئین ها ترجمه می شود. 3 x پپتید پرچم به همراه پروتئین هدف به عنوان برچسب پروتئین بیان می شود.
4. استخراج پروتئین:
سلولهای ترانسفکت شده را جمع آوری کرده و تکه تکه شدن سلول ، سانتریفیوژ و سایر درمان ها را برای به دست آوردن عصاره پروتئین کل انجام دهید.
5. پروتئین خالص:
با استفاده از تکنیک های تصفیه وابستگی مانند کروماتوگرافی ایمنی و کروماتوگرافی ، پروتئین های هدف حاوی برچسب های پپتید پرچم 3 برابر از کل عصاره خالص شدند. این معمولاً شامل اتصال آنتی بادی های ضد پرچم به پروتئین های حاوی 3 برابر پپتید پرچم و سپس جدا کردن آنها با استفاده از ستون های کروماتوگرافی میل یا دانه های مغناطیسی است.
6. پروتئین ها را شناسایی کنید:
پروتئین خالص شده توسط الکتروفورز ژل SDS-PAGE ، سیستم ایمنی بدن ، طیف سنجی جرمی و سایر فناوری ها برای اطمینان از خلوص و یکپارچگی آن اندازه گیری و اندازه گیری شد.
عوارض جانبی
در تحقیقات زیست پزشکی و آزمایشات مرتبط با پروتئین ، پپتیدهای TAG نقش مهمی دارند. آنها می توانند به محققان در تصفیه ، تشخیص و یافتن پروتئین های هدف کمک کنند ، و توسعه علوم پروتئین را بسیار ترویج می کنند.3xflag پپتیدیک پپتید برچسب رایج و گسترده است که از سه دنباله برچسب پرچم تکرار شده تشکیل شده است. برچسب پرچم در ابتدا توسط هاپ و همکاران طراحی شده است. در سال 1988 ، و بعداً به انواع مختلفی مانند 3xflag ، که دارای میل و ویژگی های بالایی هستند و می توانند به آنتی بادی های خاص متصل شوند ، باعث تسهیل انزوا و شناسایی بعدی می شوند. اگرچه 3xflag پپتید مانند سایر عوامل بیولوژیکی راحتی زیادی در آزمایشات به ارمغان آورده است ، اما ممکن است باعث ایجاد برخی از عوارض جانبی نیز شود.
عوارض جانبی مرتبط با ایمنی
وابسته به همبستگی
ایمنی زایی به توانایی یک ماده در تحریک سیستم ایمنی بدن در تولید پاسخ ایمنی. 3 XFLAG پپتید ، به عنوان یک بخش پپتید اگزوژن ، ممکن است توسط سیستم ایمنی بدن به عنوان یک مؤلفه "غیر خود" شناخته شود ، از این طریق پاسخ ایمن را ایجاد می کند. اگرچه توالی 3xflag نسبتاً کوتاه است ، در بعضی موارد ممکن است سلولهای B و سلولهای T را فعال کند و منجر به تولید آنتی بادی ها شود. این آنتی بادی ها نه تنها به پپتید 3xflag آزاد متصل می شوند ، بلکه ممکن است پروتئین های همجوشی را بیان کنند که برچسب 3XFLAG را بیان می کنند و بر عملکرد طبیعی و توزیع پروتئین فیوژن تأثیر می گذارد.
واکنشهای آلرژیک
واکنش آلرژیک یک پاسخ ایمنی غیر طبیعی است که ناشی از سیستم ایمنی بدن بیش از حد به آلرژن های خاص حساس است. افراد فردی ممکن است هنگام استفاده از پپتید 3xflag برای آزمایش یا درمان ، واکنشهای آلرژیک را تجربه کنند. شدت علائم واکنشهای آلرژیک متفاوت است. موارد خفیف ممکن است با علائم موضعی مانند خارش ، بثورات و اریتم همراه باشد ، در حالی که موارد شدید ممکن است باعث واکنش آلرژیک سیستمیک مانند شوک آنافیلاکتیک شود ، که با افت شدید فشار خون ، مشکل در تنفس و از دست دادن آگاهی مشخص می شود ، تهدید جدی برای ایمنی زندگی است.
واکنشهای آلرژیک
مکانیسم واکنشهای آلرژیک عمدتاً مربوط به آنتی بادی های IgE در سیستم ایمنی بدن است. هنگامی که بدن برای اولین بار با پپتید 3xflag در تماس قرار می گیرد ، سیستم ایمنی بدن آن را به عنوان آلرژن تشخیص می دهد و سلولهای B را تحریک می کند تا آنتی بادی های خاص IgE تولید کنند. این آنتی بادی های IgE به سطح سلولهای ماست و ائوزینوفیل ها متصل می شوند. هنگامی که بدن دوباره با پپتید 3xflag در تماس قرار می گیرد ، به آنتی بادی های IgE روی سطح سلول متصل می شود و باعث می شود ماست سلولها و ائوزینوفیل ها واسطه های فعال زیستی مانند هیستامین و لوکوترین ها را آزاد کنند و منجر به بروز علائم آلرژیک شود.
خطر ابتلا به بیماری های خود ایمنی
قرار گرفتن در معرض طولانی مدت یا مکرر در برابر پپتید 3xflag ممکن است خطر ابتلا به بیماری های خود ایمنی را افزایش دهد. بیماری های خود ایمنی به نوعی بیماری اشاره دارد که در آن سیستم ایمنی بدن به اشتباه به بافت ها و اندام های خود حمله می کند ، در نتیجه آسیب بافتی و اختلال عملکردی. 3 پپتید XFLAG ممکن است سیستم ایمنی را القا کند تا آنتی بادی های واکنشی و سلولهای T را از طریق یک سازگار با یک مکانیزم مولکولی ایجاد کند. این سلولهای ایمنی و آنتی بادی ها نه تنها به پپتید 3xflag خارجی حمله می کنند ، بلکه سهواً به بافت های طبیعی بدن آسیب می رسانند و منجر به بیماری های خود ایمنی می شوند. به عنوان مثال ، برخی از بیماری های خود ایمنی مانند لوپوس اریتماتوز سیستمیک و آرتریت روماتوئید ممکن است مربوط به واکنشهای خود ایمنی ناشی از مواد اگزوژن باشد. اگرچه در حال حاضر هیچ مدرک روشنی وجود ندارد که نشان دهد پپتید 3xflag به طور مستقیم باعث بیماری های خود ایمنی می شود ، این خطر بالقوه را نمی توان نادیده گرفت.
تأثیر بر عملکرد سلولی
سمیت سمی
در برخی از مطالعات تجربی ، مشخص شده است که غلظت بالای پپتید 3xflag ممکن است اثرات سمی بر روی سلول ها داشته باشد. تظاهرات سمیت سلولی شامل تغییر در مورفولوژی سلولی ، اختلال در یکپارچگی غشای سلولی ، تغییر در فعالیت آنزیم داخل سلولی و مهار تکثیر سلولی است. مکانیسم عمل آن ممکن است مربوط به تعامل بین پپتید 3xflag و غشای سلولی باشد. با توجه به بار منفی قوی پپتید 3xflag ، ممکن است به اجزای بار مثبت بر روی غشای سلولی از طریق فعل و انفعالات الکترواستاتیک متصل شود ، نفوذپذیری و سیالیت غشای سلولی را تغییر دهد و منجر به نشت مواد داخل سلولی یا ورود مواد مضر از خارج شود ، از این طریق عملکردهای فیزیولوژیکی عادی سلول را تحت تأثیر قرار می دهد. علاوه بر این ، پپتید 3xflag همچنین ممکن است وارد فضای داخلی سلول ها شود ، در مسیرهای سیگنالینگ ، سنتز پروتئین و سایر فرآیندها تداخل داشته باشد و بیشتر آسیب سلول را تشدید می کند.
اثرات در مسیرهای سیگنالینگ سلولی
3xflag پپتید ممکن است در مسیرهای سیگنالینگ داخل سلولی تداخل داشته و بر فعالیت های فیزیولوژیکی طبیعی سلول ها تأثیر بگذارد. مسیر سیگنالینگ سلولی یک اصطلاح جمعی برای یک سری از حوادث مولکولی است که در آن سلول ها به محرکهای خارجی پاسخ می دهند ، تنظیم فرآیندهای مهم مانند رشد سلول ، تمایز و آپوپتوز. 3 XFLAG پپتید ممکن است با تعامل با مولکول های کلیدی در مولکول های کلیدی در مسیر سیگنالینگ ، با تغییر مسیر سیگنالینگ ، با انتقال عادی مسیرهای سیگنالینگ تداخل کند. به عنوان مثال ، ممکن است به گیرنده های سطح سلول متصل شود ، از نظر رقابتی مهار اتصال لیگاندهای طبیعی به گیرنده ها و مسدود کردن انتقال سیگنال. از طرف دیگر ، می تواند وارد سلول شود و به پروتئین های انتقال سیگنال متصل شود ، و بر فسفوریلاسیون پروتئین ، دفسفوریلاسیون و سایر فرآیندهای اصلاح تأثیر می گذارد و در انتقال و تقویت سیگنال دخالت می کند. این تداخل در مسیرهای سیگنالینگ سلولی ممکن است منجر به اختلال عملکرد سلولی شود و بر فرآیندهایی مانند تکثیر سلولی ، تمایز و آپوپتوز تأثیر می گذارد که به نوبه خود می تواند اثرات منفی بر رشد طبیعی و عملکرد بافت ها و اندام ها داشته باشد.
تأثیر بر متابولیسم سلولی
متابولیسم سلولی اصطلاح کلی برای یک سری از واکنشهای شیمیایی است که در سلول ها رخ می دهد ، تأمین انرژی و ماده برای فعالیت های زندگی سلولی. 3} پپتید XFLAG ممکن است بر فرآیندهای متابولیک سلولی تأثیر بگذارد ، در تولید انرژی سلولی و سنتز ماده دخالت کند. به عنوان مثال ، این ممکن است بر عملکرد میتوکندری تأثیر بگذارد ، که سایت های اصلی برای تنفس هوازی و تولید انرژی در سلول ها هستند . 3 پپتید XFLAG ممکن است با تعامل با پروتئین ها یا لیپیدها بر روی غشای غشای میتوکندری و پتانسیل ، تأثیر بگذارد ، تأثیر می گذارد و بر عملکرد زنجیره ای میتوکندری و انسداد میتوکندری و انسداد سلول های موجود علاوه بر این ، پپتید 3xflag همچنین ممکن است در فرآیندهای داخل سلولی مانند متابولیسم گلوکز و متابولیسم لیپیدها تداخل داشته باشد ، این امر بر توازن سنتز مواد و تجزیه در سلول ها تأثیر می گذارد و تأثیر منفی بر عملکردهای فیزیولوژیکی طبیعی سلول ها دارد.
حرفه ای
ما انواع اجزای انتقال ، از جمله اسپکت ها ، زنجیرهای غلتکی ، چرخ دنده ها ، کوپلینگ ها ، قفسه ها ، هاب ها ، قرقره ها ، آستین های مخروط ، صندلی های بلبرینگ و موارد دیگر را ارائه می دهیم.
تگ های محبوب: 3xflag Peptide CAS 402750-12-3 ، تأمین کنندگان ، تولید کنندگان ، کارخانه ، عمده فروشی ، خرید ، قیمت ، فله ، برای فروش