IPTG یا ایزوپروپیل β-D-1-تیوگالاکتوپیرانوسید، یک معرف شناخته شده در زمینه زیست شناسی مولکولی است. به عنوان یکمعرف IPTGتأمین‌کننده، من از نزدیک دیده‌ام که چگونه این ماده شیمیایی کوچک می‌تواند تأثیر زیادی بر تحقیقات پروتئین داشته باشد، به‌ویژه وقتی صحبت از اصلاح پس از ترجمه پروتئین‌ها می‌شود.
معرف IPTG
کد کالا: BM-2-5-091
نام انگلیسی: IPTG
CAS NO.: 367-93-1
MF: C9H18O5S
مگاوات: 238.3
EINECS: 206-703-0
سازنده: BLOOM TECH Wuxi Factory
تجزیه و تحلیل: HPLC، LC-MS، HNMR
بازار اصلی: ایالات متحده آمریکا، استرالیا، برزیل، ژاپن، آلمان، اندونزی، انگلستان، نیوزیلند، کانادا و غیره
پشتیبانی فناوری: بخش R&D-4
ما فراهم می کنیممعرف IPTGلطفا برای اطلاع از مشخصات دقیق و اطلاعات محصول به وب سایت زیر مراجعه نمایید.
محصول:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html
اصلاح پس از ترجمه چیست؟
قبل از اینکه به چگونگی تأثیر IPTG بر اصلاح پس از ترجمه بپردازیم، اجازه دهید به سرعت به این بپردازیم که اصلاح پس از ترجمه چیست. پس از سنتز پروتئین از mRNA در فرآیندی به نام ترجمه، اغلب دستخوش تغییرات شیمیایی مختلفی می شود. این تغییرات می تواند ساختار پروتئین، عملکرد، پایداری و توانایی آن در تعامل با مولکول های دیگر را تغییر دهد. برخی از تغییرات رایج پس از ترجمه عبارتند از فسفوریلاسیون، گلیکوزیلاسیون، استیلاسیون و یوبی کوئیتیناسیون.
چگونه IPTG در بیان پروتئین کار می کند
IPTG به طور گسترده ای به عنوان یک القا کننده در بیان پروتئین های نوترکیب در باکتری ها، به ویژه در E. coli استفاده می شود. در E.coli، اپرون لاک مجموعه ای از ژن هایی است که در متابولیسم لاکتوز نقش دارند. به طور معمول، اپرون لاک سرکوب می شود، اما زمانی که IPTG به کشت اضافه می شود، به پروتئین سرکوب کننده لاک متصل می شود و باعث تغییر ساختاری می شود. این تغییر، رپرسور را از ناحیه عملگر اپرون لاک آزاد می‌کند و به RNA پلیمراز اجازه می‌دهد تا ژن‌ها را در پایین دست، از جمله ژن کدکننده پروتئین نوترکیب مورد علاقه ما، متصل و رونویسی کند.
تأثیر بر پست - اصلاح ترجمه
فسفوریلاسیون
فسفوریلاسیون یکی از مهمترین تغییرات پس از ترجمه است. این می تواند فعالیت پروتئین، محلی سازی، و فعل و انفعالات را تنظیم کند. هنگامی که IPTG برای القای بیان پروتئین استفاده می شود، می تواند به طور غیر مستقیم بر فسفوریلاسیون تأثیر بگذارد. به عنوان مثال، بیان بیش از حد یک پروتئین القا شده توسط IPTG ممکن است منجر به عدم تعادل در سیستم کیناز - فسفاتاز سلول شود. برخی کینازها ممکن است با مقدار زیادی سوبسترا (پروتئین تازه سنتز شده) غرق شوند که منجر به فسفوریلاسیون کمتر یا بیش از حد می شود.
علاوه بر این، افزایش فعالیت متابولیک در سلول به دلیل بیان بیش از حد پروتئین می تواند در دسترس بودن ATP را تغییر دهد، که دهنده فسفات برای واکنش های فسفوریلاسیون است. این می تواند بیشتر الگوهای فسفوریلاسیون طبیعی پروتئین بیان شده را مختل کند.
گلیکوزیلاسیون
گلیکوزیلاسیون افزودن گروه های کربوهیدراتی به پروتئین ها است. باکتری هایی مانند E. coli که معمولاً برای بیان پروتئین با IPTG استفاده می شوند، دستگاه گلیکوزیلاسیون مشابه سلول های یوکاریوتی را ندارند.
با این حال، وجود بیان پروتئین ناشی از IPTG هنوز هم می تواند تأثیر داشته باشد. افزایش تقاضا برای منابع سلولی در طول بیان بیش از حد پروتئین می تواند منجر به کمبود قندهای نوکلئوتیدی شود که بلوک های سازنده گلیکوزیلاسیون هستند. این می تواند منجر به الگوهای گلیکوزیلاسیون ناقص یا غیر طبیعی شود اگر پروتئین دارای مکان های گلیکوزیلاسیون بالقوه باشد.
استیلاسیون
استیلاسیون یکی دیگر از تغییرات مهم پس از ترجمه است که می تواند بر ثبات و عملکرد پروتئین تأثیر بگذارد. بیان پروتئین ناشی از IPTG می تواند محیط داخل سلولی را تغییر دهد. به عنوان مثال، افزایش تولید پروتئین ها می تواند سطوح استیل - CoA را که اهدا کننده استیل برای واکنش های استیلاسیون است، تغییر دهد. اگر سطح استیل - CoA به دلیل بیان پروتئین سطح بالا کاهش یابد، می تواند منجر به کاهش استیلاسیون پروتئین بیان شده شود.
مطالعات موردی
بیایید به چند مثال واقعی نگاه کنیم. در یک مطالعه، محققان در تلاش برای بیان پروتئین نوترکیب انسانی در E. coli با استفاده از IPTG بودند. آنها متوجه شدند که این پروتئین دارای الگوهای فسفوریلاسیون متفاوتی در مقایسه با پروتئین بومی در سلول های انسانی است. بیان بیش از حد ناشی از IPTG منجر به یک حالت فسفوریلاسیون غیرطبیعی شد که بر فعالیت پروتئین تأثیر گذاشت.
مثال دیگر مربوط به گلیکوزیلاسیون است. هنگامی که یک گلیکوپروتئین در E. coli با IPTG بیان شد، فقدان دستگاه گلیکوزیلاسیون مناسب در E. coli با محدودیت‌های منابع ناشی از بیان بیش از حد ناشی از IPTG منجر به یک پروتئین غیر عملکردی شد. الگوی گلیکوزیلاسیون غیرطبیعی از تا شدن پروتئین و تعامل با مولکول های هدف خود جلوگیری می کرد.
نقش IPTG در تحقیق و صنعت
IPTG یک ابزار کلیدی در تحقیقات و صنعت بیوتکنولوژی است. در تحقیقات، به دانشمندان اجازه می دهد تا عملکرد پروتئین ها را با بیان بیش از حد آنها به صورت کنترل شده مطالعه کنند. در صنعت بیوتکنولوژی، برای تولید در مقیاس بزرگ پروتئین های نوترکیب برای اهداف درمانی و تشخیصی استفاده می شود.
با این حال، تأثیر IPTG بر اصلاح پس از ترجمه باید به دقت مورد توجه قرار گیرد. به عنوان مثال، اگر پروتئینی برای استفاده درمانی در نظر گرفته شده باشد، هرگونه تغییر غیرطبیعی پس از ترجمه می تواند بر ایمنی و کارایی آن تأثیر بگذارد. بنابراین، محققان و متخصصان صنعت باید شرایط القایی IPTG را برای به حداقل رساندن این اثرات بهینه کنند.
سایر معرف های مرتبط
به عنوان یک تامین کننده معرف IPTG، من همچنین می خواهم به برخی از معرف های دیگر که مربوط به تحقیقات پروتئین هستند اشاره کنم. شما ممکن است علاقه مند باشیدپودر آمی تریپتیلین هیدروکلراید CAS 549 - 18 - 8که در برخی از مطالعات تحقیقاتی مرتبط با برهمکنش پروتئین - مولکول کوچک استفاده می شود.سیلنژیتیدمعرف جالب دیگری است که می تواند در مطالعه برهمکنش های پروتئین - سلول استفاده شود. وپروتوپورفیرین IX CAS 553 - 12 - 8در برهمکنش های پروتئین - هم کاربرد دارد.
نتیجه گیری و فراخوان برای اقدام
در نتیجه، IPTG یک معرف قدرتمند است که تأثیر قابل توجهی در اصلاح پس از ترجمه پروتئین ها دارد. در حالی که یک ابزار ارزشمند برای بیان پروتئین است، ما باید از اثرات بالقوه آن بر اصلاح پس از ترجمه آگاه باشیم. چه یک محقق در آزمایشگاه یا یک متخصص در صنعت بیوتکنولوژی باشید، درک این اثرات برای تحقیق و تولید موفق پروتئین بسیار مهم است.
اگر به خرید معرف IPTG با کیفیت بالا یا هر یک از معرف های مرتبط دیگری که ذکر کردم علاقه مند هستید، با خیال راحت تماس بگیرید. ما اینجا هستیم تا بهترین محصولات و پشتیبانی را برای نیازهای تحقیقاتی پروتئین شما ارائه دهیم.
مراجع
آلبرتز، بی.، جانسون، ا.، لوئیس، جی.، راف، ام.، رابرتز، ک.، و والتر، پی. (2002). زیست شناسی مولکولی سلول. علم گارلند.
Sambrook, J., & Russell, DW (2001). شبیه سازی مولکولی: راهنمای آزمایشگاهی. مطبوعات آزمایشگاهی Cold Spring Harbor.