در قلمرو زیست شناسی مولکولی و بیوتکنولوژی، بیان پروتئین فرآیندی حیاتی است که تولید پروتئین های خاص را برای کاربردهای مختلف، از جمله تحقیق، توسعه دارو و تولید صنعتی، امکان پذیر می سازد. یکی از اجزای کلیدی در بسیاری از سیستم های بیان پروتئین، پودر ایزوپروپیل β-D-1-تیوگالاکتوپیرانوسید (IPTG) است. به عنوان تامین کننده پیشرو ازپودر IPTG، اغلب از من در مورد نحوه تعامل پودر IPTG با فاکتورهای رونویسی در طول بیان پروتئین سؤال می شود. در این پست وبلاگ، من به علم پشت این تعامل می پردازم و اهمیت آن را در این زمینه روشن می کنم.
پودر Iptg
کد محصول: BM-2-5-133
نام: Iptg
شماره CAS: 367-93-1
MF: C9H18O5S
مگاوات: 238.3
شماره EINECS: 206-703-0
بازار: اندونزی، انگلستان، نیوزیلند، کانادا و غیره
سازنده: BLOOM TECH کارخانه گوانگژو
خدمات فناوری: بخش R&D-4
حمل و نقل: حمل و نقل به عنوان نام ترکیب شیمیایی بدون حساسیت دیگر.
ما پودر IPTG را ارائه می دهیم، لطفا برای مشخصات دقیق و اطلاعات محصول به وب سایت زیر مراجعه کنید.
محصول:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html
درک بیان پروتئین و فاکتورهای رونویسی
قبل از اینکه تعامل بین پودر IPTG و فاکتورهای رونویسی را بررسی کنیم، اجازه دهید ابتدا اصول بیان پروتئین را درک کنیم. بیان پروتئین فرآیندی است که طی آن توالی DNA یک ژن به یک پروتئین عملکردی تبدیل می شود. این فرآیند شامل دو مرحله اصلی است: رونویسی و ترجمه.
رونویسی اولین مرحله در بیان پروتئین است که در آن توالی DNA یک ژن در یک مولکول RNA پیام رسان (mRNA) کپی می شود. این فرآیند توسط آنزیمی به نام RNA پلیمراز انجام می شود که به ناحیه خاصی از DNA به نام پروموتر متصل می شود. پروموتر حاوی عناصر تنظیمی است که شروع رونویسی را کنترل می کند.
فاکتورهای رونویسی پروتئین هایی هستند که به توالی های DNA خاصی در ناحیه پروموتر متصل می شوند و فعالیت RNA پلیمراز را تنظیم می کنند. آنها بسته به عملکرد خاص آنها می توانند رونویسی یک ژن را تقویت یا مهار کنند. فاکتورهای رونویسی نقش مهمی در کنترل بیان ژن دارند و در طیف وسیعی از فرآیندهای بیولوژیکی از جمله توسعه، تمایز و پاسخ به محرک های محیطی نقش دارند.
نقش IPTG در بیان پروتئین
IPTG آنالوگ مصنوعی لاکتوز است، قند طبیعی موجود در شیر. در بسیاری از سیستم های بیان پروتئین، IPTG به عنوان یک القاء کننده برای فعال کردن بیان ژن هایی که تحت کنترل اپرون لاک هستند استفاده می شود. لاک اپرون گروهی از ژن های موجود در باکتری ها است که در متابولیسم لاکتوز نقش دارند.
در غیاب لاکتوز، یک پروتئین سرکوب کننده به نام LacI به ناحیه عملگر اپرون لاک متصل می شود و از اتصال RNA پلیمراز به پروموتر و شروع رونویسی جلوگیری می کند. هنگامی که لاکتوز در محیط وجود دارد، به LacI متصل می شود و باعث تغییر ساختاری در پروتئین سرکوب کننده می شود و آن را از ناحیه عملگر آزاد می کند. این به RNA پلیمراز اجازه می دهد تا به پروموتر متصل شود و رونویسی ژن ها را در اپرون لاک آغاز کند.
IPTG با اتصال به LacI و ایجاد تغییر ساختاری مشابه، عمل لاکتوز را تقلید می کند. با این حال، برخلاف لاکتوز، IPTG توسط باکتری متابولیزه نمی شود، بنابراین در سلول باقی می ماند و به فعال سازی بیان ژن ادامه می دهد. این امر باعث می شود که IPTG یک القاء کننده قوی بیان پروتئین در بسیاری از سیستم های بیان باکتریایی باشد.
تعامل بین پودر IPTG و فاکتورهای رونویسی
تعامل بین پودر IPTG و فاکتورهای رونویسی در طول بیان پروتئین پیچیده است و شامل مراحل متعددی است. در اینجا مروری گام به گام از این فرآیند است:
اتصال IPTG به LacI: هنگامی که IPTG به محیط کشت اضافه می شود، در سلول های باکتری منتشر می شود و به پروتئین سرکوب کننده LacI متصل می شود. این اتصال باعث تغییر ساختاری در LacI می شود و آن را از ناحیه عملگر اپرون لاک آزاد می کند.
فعال سازی رونویسی: هنگامی که LacI از ناحیه عملگر آزاد می شود، RNA پلیمراز می تواند به پروموتر متصل شود و رونویسی ژن ها را در اپرون لاک آغاز کند. ژنهای موجود در اپرون لاک معمولاً شامل ژن کدکننده پروتئین مورد نظر و همچنین سایر ژنهای دخیل در متابولیسم لاکتوز هستند.
استخدام عوامل رونویسیعلاوه بر RNA پلیمراز، سایر فاکتورهای رونویسی نیز ممکن است در ناحیه پروموتر برای تقویت رونویسی ژن ها در اپرون لاک استفاده شوند. این فاکتورهای رونویسی می توانند به توالی های DNA خاصی در پروموتر متصل شوند و با RNA پلیمراز تعامل کنند تا فعالیت آن را افزایش دهند.
تقویت بیان پروتئین: جذب فاکتورهای رونویسی و فعال شدن RNA پلیمراز منجر به افزایش رونویسی ژن ها در اپرون لاک می شود. این به نوبه خود منجر به افزایش تولید پروتئین مورد نظر می شود.
اهمیت تعامل
تعامل بین پودر IPTG و فاکتورهای رونویسی در طول بیان پروتئین از اهمیت زیادی در زمینه بیولوژی مولکولی و بیوتکنولوژی برخوردار است. در اینجا برخی از مزایای کلیدی استفاده از IPTG به عنوان القا کننده بیان پروتئین آورده شده است:
بیان پروتئین سطح بالاIPTG یک القاء کننده قوی بیان پروتئین است که امکان تولید سطوح بالایی از پروتئین مورد نظر را فراهم می کند. این امر به ویژه برای کاربردهایی که مقادیر زیادی پروتئین مورد نیاز است، مانند توسعه دارو و تولید صنعتی، بسیار مهم است.
تنظیم دقیق بیان ژن: استفاده از IPTG به عنوان یک القا کننده، تنظیم دقیق بیان ژن را امکان پذیر می کند. بیان ژن ها در اپرون لاک را می توان با تنظیم غلظت IPTG در محیط کشت کنترل کرد. این به محققان اجازه می دهد تا بیان پروتئین مورد نظر را بهینه کرده و تولید پروتئین های ناخواسته را به حداقل برسانند.
تطبیق پذیریIPTG را می توان در طیف گسترده ای از سیستم های بیان باکتری استفاده کرد و آن را به ابزاری همه کاره برای بیان پروتئین تبدیل می کند. این با بسیاری از انواع مختلف باکتری، از جمله اشریشیا کلی، که یکی از رایج ترین باکتری های مورد استفاده برای بیان پروتئین است، سازگار است.
مقرون به صرفهIPTG یک القاء کننده نسبتاً ارزان بیان پروتئین است که آن را به گزینه ای مقرون به صرفه برای محققان و شرکت های بیوتکنولوژی تبدیل می کند. این به راحتی از بسیاری از تامین کنندگان، از جمله شرکت ما، در دسترس است و می تواند به راحتی در پروتکل های بیان پروتئین موجود گنجانده شود.
سایر محصولات برای تحقیق
علاوه بر پودر IPTG، ما همچنین طیف وسیعی از محصولات با کیفیت بالا را برای اهداف تحقیقاتی ارائه می دهیم. مثلا ما عرضه می کنیمپودر آگوملاتین CAS 138112-76-2که در تحقیقات داروهای ضد افسردگی و تنظیم ریتم شبانه روزی استفاده می شود. محصول دیگر استپودر پیریدوکسین هیدروکلراید CAS 58-56-0شکل مهمی از ویتامین B6 است که نقش مهمی در واکنشهای مختلف بیوشیمیایی در بدن انسان دارد و اغلب در تحقیقات تغذیهای و دارویی استفاده میشود. ما نیز ارائه می دهیمPefloxacin Mesylate Dihydrate CAS 149676-40-4که خاصیت ضد باکتریایی دارد و در زمینه تحقیقات میکروبیولوژی مفید است.
برای خرید و همکاری تماس بگیرید
اگر علاقه مند به خرید پودر IPTG یا هر یک از محصولات دیگر ما برای تحقیق خود هستید، لطفا با ما تماس بگیرید. تیم متخصص ما به ارائه محصولات با کیفیت بالا و خدمات عالی به مشتریان اختصاص دارد. ما می توانیم اطلاعات دقیق محصول، پشتیبانی فنی و قیمت رقابتی را به شما ارائه دهیم. چه یک آزمایشگاه تحقیقاتی کوچک باشید و چه یک شرکت بزرگ بیوتکنولوژی، ما متعهد به رفع نیازهای شما و کمک به شما در دستیابی به اهداف تحقیقاتی خود هستیم. از تماس با ما برای شروع بحث در مورد نیازهای خود دریغ نکنید.
مراجع
- میلر، جی اچ (1972). آزمایش در ژنتیک مولکولی آزمایشگاه کلد اسپرینگ هاربر.
- Sambrook, J., Fritsch, EF, & Maniatis, T. (1989). شبیه سازی مولکولی: کتابچه راهنمای آزمایشگاهی (ویرایش دوم). مطبوعات آزمایشگاهی Cold Spring Harbor.
- Studier، FW، & Moffatt، BA (1986). استفاده از باکتریوفاژ T7 RNA پلیمراز برای هدایت بیان انتخابی سطح بالای ژن های کلون شده. مجله زیست شناسی مولکولی، 189 (1)، 113-130.